排气扇一开,把细胞操作台的玻璃往下一拿,方子业就开始对培养瓶里面的细胞进行胰酶消化。
胰酶消化,是很多操作都必须要经过的一步。
细胞在培养瓶内时,是贴壁而生,需要消化后,将细胞悬浮起来,如此才能够离心将细胞与试剂分离,然后进行传代、分装,转移到培养皿以及培养板中,相当于是一个过程性的操作。
这一个操作,可以类比为你从你常住地出家门口这一步,不管你下楼吃饭、下楼买水果,或者是做其他的事情,伱首先得从门口跨出去。
这一步,是很简单的,没有太多的操作性可言,主要的功劳,都是离心机的。
方子业抽去胰酶悬浮液,避免过度消化把细胞给弄死了。
因为贴壁生长的细胞,就相当于是在寝室里熟睡的小学生,胰酶相对于给寝室里扔一颗烟雾弹。
但烟雾弹只是让他们出寝室这个门,而不是把他们关在里面给熏死了。
然而,等到方子业把分离好的细胞群都完全悬浮起来,重新进行了配比之后。
方子业就赶紧先把悬浮的细胞进行一次计数处理。
细胞的计数操作,暂时不在细胞房里,得去匀一点试剂,去跑一下流式细胞仪,把浓度确定好。
同一批样品内的细胞浓度,可以等同。
就好比你喝一瓶饮料,第一口和最后一口,原理上应该是甜度或者味道是对等的。
可计数完后,方子业并未把样品带回,而是在那边,就直接封闭丢进了生物垃圾袋里。
但知道了浓度之后,方子业的操作就开始了。
稀释样品,其实原理很简单,就是把1ml的样品,加入99ml的水,然后就稀释了一百倍,而如果是把1ml的样品,加入到999ml的液体里面,就是稀释了一千倍。
而在进行浓度梯度的实验时,就需要重复操作这么一次,一般每次是稀释10倍数。
按照正常的操作,其实只需要提前把液体量配好。9ml、99ml、999ml。
然后再加入1ml的细胞悬浮液进去,然后分别配匀后,再抽取9ml+1ml中的1ml,转移到99ml中即可。
最多就是换几个移液枪头的事情。
但今天的方子业,却不是这么操作的。
他是把移液器,调到了200uL后,再直接往下面挤出来1ul、10ul以及100ul的量,到培养皿中。
本章未完,请点击下一页继续阅读!